將核酸接上小分子的方法

專利類型

發明

專利國別 (專利申請國家)

中華民國

專利申請案號

100101162

專利證號

I 464402

專利獲證名稱

將核酸接上小分子的方法

專利所屬機關 (申請機關)

高雄醫學大學

獲證日期

2014/12/11

技術說明

　　我們開發出ㄧ個新的phosphoramidation方法，有別於先前phosphoramidation方法必須在有機溶液進行，或是有低產率的困難；但經由利用我們的新phosphoramidation方法，我們能夠有效製備核酸胜肽鍵結產物(peptide-oligonucleotide conjugates; POCs)或其它核酸的鍵結產物。核酸的部份，不論是天然的或人工合成的DNA或RNA都能利用它們尾端的磷酸根作為phosphoramidation反應中的反應物來和帶有amine的分子（例如：生物素和螢光發光團的衍生物、蛋白質或胜肽）鍵結，其中最重要的就是與胜肽的鍵結，它能用來合成治療用的POCs。不論是天然或人工合成的胜肽都能在phosphoramidation反應中當作親核基，而且添加不具親核性的界面活性劑，能夠增加本反應的產率。用這個方法準備POCs還能完整保持核酸的鹼基配對特性，這是利用POCs能有效的作為基因治療的試劑的重要特性與依據；我們在此藉著利用兩階段phosphoramidation反應合成出核酸-tetraglycine來證明合成POCs的能力及其優異的產率。另外，我們利用phosphoramidation反應來輕易的備製核酸－BSA (bovine serum albumin)鍵結產物，並能獲得不錯的產率。 這個新的phosphoramidation反應提供一個在水溶液中輕易的製備POCs或其它核酸的鍵結產物，並且有很高的產率，而且當一般的生物和化學實驗室或工商業界需要制備POCs來做研究或商業生產時的時候，能利用這個方法輕易的製備出所需的POCs。 An effective and reproducible approach to prepare POCs and other nucleic acid conjugates based on a newly developed nucleic acid phosphoramidation method is developed. Any nucleic acids, including natural and nonnatural DNA and RNA, with a terminal phosphate group are suitable reactants in phosphoramidation reactions to conjugate with amine-containing molecules such as biotin and fluorescein derivatives, proteins and, most importantly, peptides to enable the synthesis of POCs for therapeutic applications. Both natural and synthetic peptides are suitable nucleophiles in phosphoramidation reactions. Surfactants with no nucleophilic functionalities are required to enhance phosphoramidation reaction yields. The phosphoramidation approach preserves the integrity of hybridization specificity in nucleic acids when preparing POCs. By retaining integrity of the nucleic acids, their effectiveness as therapeutic reagents for gene silencing, gene therapy and RNA interference is ensured.

備註

連絡單位 (專責單位/部門名稱)

智財保護與科技管理組

連絡電話

07-3138030

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