純化蛋白質的方法METHOD OF PROTEIN PURIFICATION

專利類型

發明

專利國別 (專利申請國家)

美國

專利申請案號

13/753,496

專利證號

US 9,328,136 B2

專利獲證名稱

純化蛋白質的方法METHOD OF PROTEIN PURIFICATION

專利所屬機關 (申請機關)

國立交通大學

獲證日期

2016/05/03

技術說明

一種用於蛋白質純化之胜肽及方法。其中該胜肽係能在特定pH值下自發斷裂。將該胜肽與一標記物（tag）及目標蛋白融合表現後進行純化。在本發明所提供之蛋白質純化方法中，係以一奈米磁性粒子，能與標記物-胜肽-目標蛋白結合標記物結合，該標記物係為6~8個His-tag。步驟如下: 1. 將菌體表現或發酵生產之帶有His-tag之標的蛋白與磁性奈米粒子在緩衝溶液中混合反應，帶有 His-tag之標的蛋白可與磁性奈米粒子進行專一性之配位鍵結。 2.以磁鐵吸附磁性奈米粒子與標的蛋白之結合物，移除溶液。 3.以緩衝液清洗磁性奈米粒子與標的蛋白之結合物3次。 4.加入適量pH7之緩衝液，使胜肽linker自我裂解。 5.以磁鐵吸附磁性奈米粒子，上清液即為所要之標的蛋白。 The present invention discloses a peptide and a method for protein purification. The peptide is self-cleaving in a solution with a specific pH. The method in the present invention is including binding to a tag linked with the target protein with a magnetic nanoparticle, wherein the tag containing 6~8 histidine; self-cleaving the peptide from the target protein in a solution with pH 6~9; regenerating the peptide with a solution at pH4~5.

備註

本會(收文號1120019924)同意該校112年4月7日陽明交大研產學字第1120010771號函申請終止維護專利(國立陽明交通大學)

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