具有螢光基團之鄰羥基苯甲酸衍生物及其製造與使用方法

專利類型

發明

專利國別 (專利申請國家)

中華民國

專利申請案號

100101408

專利證號

I 454455

專利獲證名稱

具有螢光基團之鄰羥基苯甲酸衍生物及其製造與使用方法

專利所屬機關 (申請機關)

國立臺北科技大學

獲證日期

2014/10/01

技術說明

水楊酸羥化酶(Salicylate hydroxylase , SHL)與 NADH於有氧環境下催化受質水楊酸去碳氧化反應形成鄰苯二酚(catechol)。水楊酸羥化酶配合NAD(P)+ 還原去氫脢膠連固定於克拉克電化學電極建立的電化學生物檢測器平台已使用於檢測生理分子與環境危害物，但由於膠連固定酵素需較複雜製程技術，製成電極不易保存因此無法廣泛使用；開發低成本與簡易技術針對水楊酸羥化酶搭配NAD(P)+ 還原去氫脢所使用的檢測法將有助於推廣此檢測平台。本專利主要針對水楊酸羥化酶開發出專一不具螢光的隱藏式螢光分子探針(SHLF)可運用於水楊酸羥化酶配合NAD(P)+ 還原去氫脢生物檢測平台。水楊酸羥化酶與NADH於有氧環境下催化SHLF的水楊酸辨認結構進行去碳氧化反應後，進而催化連鎖反應釋放出近紅外光(em = 595 nm)的隱藏光螢光分子螢光。隱藏式螢光分子探針(SHLF)的合成方法簡易只需2合成步驟且保存容易。SHLF、水楊酸羥化酶、NAD+搭配NAD(P)+ 還原去氫脢針對膽固醇(cholesterol)或3-羥基丁酸酯(3-hydroxy butyrate)的檢測平台具高靈敏度檢測膽固醇(cholesterol)或3-羥基丁酸酯(3-hydroxy butyrate)，檢測範圍於nanomolar的範圍比現今電化學法更加靈敏。 Salicylate hydroxylase (SHL) catalyzes the production of catechol (plus CO2 and H2O) from salicylate, NADH and O2. We synthesized the first new long-wavelength latent fluorogenic substrate SHLF (3) for SHL. In the presence of NADH and under aerobics conditions, SHL catalyzes the decarboxylative hydroxylation of SHLF followed by a quinone-methide-type rearrangement reaction concomitant ejects a fluorescence coumarin 2, which are spontaneous and irreversible at physiological temperatures in aqueous media. Furthermore, SHLF is a sensitive fluorimetric indicator for analyte determination in the SHL-coupled dehydrogenase assay in which NAD+ is converted to NADH. This novel fluorescence assay detected 3-hydroxybutyrate and cholesterol in the nanomolar range that are more sensitive than the current SHL-dehydrogrenase amperometric sensors, making it applicable to the construction of fiber-optic fluorescence biosensors for clinical diagnostic uses.

備註

本部(收文號1090026809)同意該校109年5月8日北科大產學字第1097900107號函申請終止維護專利(北科大)

連絡單位 (專責單位/部門名稱)

專利技轉組

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