修飾的啟動子序列及其應用

專利類型

發明

專利國別 (專利申請國家)

中華民國

專利申請案號

103124951

專利證號

I 530503

專利獲證名稱

修飾的啟動子序列及其應用

專利所屬機關 (申請機關)

元智大學

獲證日期

2016/04/21

技術說明

人類表皮生長因子 (Epidermal Growth Factor，簡稱EGF)能夠促進表皮細胞生長，對於組織器官及皮膚的修復也提供重要的作用。由於EGF能促進表皮細胞的分裂，刺激皮膚細胞之更新及改善細胞的新陳代謝等功效，因此被廣泛的應用到美容及化粧保養品上。本人類表皮生長因子重組基因經核酸重新編碼，並與人類蛋白結合，稱為H-EGF，本發明為增加此重組蛋白在水稻細胞的產量與穩定性。本發明揭露一種用水稻細胞用之誘導性基因重組合成啟動子synthetic alpha Amy8 promoter，表現一穩定性高之人類表皮生長因子重組蛋白，其係將一編碼為Seq NO：1之合成啟動子(synthetic alpha Amy8 promoter)序列，Seq NO：2之基因序列與Seq No 3人類表皮生長因子基因序列重組，稱H-EGF，構築於一表現載體上，用水稻細胞將此H-EGF蛋白分泌至培養液中，生產穩定性高之人類表皮生長因子重組蛋白。本技術應用水稻α-amylase啟動子及其分泌訊號蛋白，接上重組之人類表皮生長因子基因，以農桿菌轉殖送入水稻細胞，建立穩定的轉殖水稻懸浮細胞系，人類表皮生長因子重組蛋白從水稻細胞培養液穩定產出，並具生物活性。 The human EGF (EGF) regulates cell proliferation and is involved in the embryonic development, tissue repair, wound healing, and carcinogenesis. Currently, EGF is in high demand in pharmaceutical and cosmetic industries. By utilizing a modified recombinant rice alpha-amylase 8 promoter, a signal peptide of rice α-amylase 3, recombinant proteins produced are secreted out of the cell into the culture medium, eliminating the need for protein extraction through cell lysis. Via this rice recombinant protein expression system, the recombinant EGF modified with rice preferred codons and fused to human protein, called H-EGF, is stable expressed in rice transgenic cells. The bio-active recombinant H-EGF proteins are stably produced and secreted into cultured medium.

備註

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