生產吲哚類衍生物的新穎方法METHOD FOR PRODUCING INDOLE DERIVATIVE

專利類型

發明

專利國別 (專利申請國家)

美國

專利申請案號

13/920,681

專利證號

US 9,169,503 B2

專利獲證名稱

生產吲哚類衍生物的新穎方法METHOD FOR PRODUCING INDOLE DERIVATIVE

專利所屬機關 (申請機關)

國立交通大學

獲證日期

2015/10/27

技術說明

本發明提出兩個異體表現的大腸桿菌系統與方法，可以在體外系統(in vitro)進行一鍋式反應(one-pot reaction)，產生具有抗癌、神經保護或抗生素等生物活性之吲哚類化合物的新穎方法。系統一具有醣基轉移酵素(如NokL)；系統二則具有L-胺基酸氧化酵素(如NokA)。此二系統皆可於一個試管中，同時加入前趨物(前者如TDP-Glucose與吲哚類配醣體等；後者如L-tryptophan或其類似物等)與酵素粗抽液，經過一段時間的反應，前者即生合成得K-252d (rhamnosyl-K252c)或其衍生物，後者即生合成得ICA或其衍生物。 本發明的整套製程只需製備一批酵素，經過一道步驟即可完成，達到精簡流程又提高效率之目的。其體外反應系統，可以輕易替換各種前趨物(受質)類似物、或修改各種反應條件，可避免酵素因受質專一性導致產率下降之困擾，因此可輕易獲得各種衍生物。其反應產物組成單純，純化容易，整套流程簡易且高效率。 利用本發明系統，搭配上各種結構不同之前趨物，如吲哚類配醣體或L-tryptophan之類似物，即可有效率生合成各種吲哚類化合物，達到拓展多樣性吲哚類化合物之目的，可產生具有高效藥性(如抗癌等)之化合物，達到藥物研發或疾病治療之目的。 The present invention provides an efficient method for in vitro producing indole molecules (of neuroprotective, anticancer or antibiotics activities) in a one-pot reaction. The method for producing a rhamnosylated indolocarbazole compound or its analog includes the steps of transforming a plasmid carrying a gene encoding N-glycosyltransferase (N-gtf) into a bacterial strain and expressing the gene therein; lysing the strain to obtain a crude enzyme extract; and adding TDP-glucose, an indolocarbazole aglycone and a metal ion in the crude enzyme extract for performing an enzymatic reaction to form the compound. The method for producing an indole-3-carboxaldehyde (ICA) analog includes the steps of transforming a plasmid carrying a gene encoding NokA of Nocardiopsis sp. K-252 into a bacterial strain and expressing the gene therein; lysing the bacterial strain to obtain a crude enzyme extract; and adding an L-tryptophan analog for performing an enzymatic reaction to form ICA analogs.

備註

本部(收文號1100065219)同意該校110年10月27日陽明交大研產學字第1100036963號函申請終止維護專利(陽明交大)

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