用於增強蛋白質表現之核酸序列區段、包含其序列區段之表現載體及包含其表現載體之套組

專利類型

發明

專利國別 (專利申請國家)

中華民國

專利申請案號

104109949

專利證號

I 554608

專利獲證名稱

用於增強蛋白質表現之核酸序列區段、包含其序列區段之表現載體及包含其表現載體之套組

專利所屬機關 (申請機關)

中國醫藥大學

獲證日期

2016/10/21

技術說明

鑑於市售載體不利應用於量產及純化重組蛋白激酶與市售重組蛋白激酶低純度等缺點，本團隊開發一新的pHH-SV1載體骨架以克服前述限制。本發明以Alpha-kinase 1 (ALPK1) 激酶為例來說明此選殖載體的優越性與應用性。由於市售相關ALPK1載體或蛋白激酶並未能解決我們研究的需求，因此我們研發一新的ALPK1表現載體，並成功可於真核細胞量產，其重組蛋白質純度亦大於90％，其研發成果可應於後續相當多的蛋白質體分析上。本發明係有關一種選殖載體的研發，利用分子選殖與重組蛋白質純化技術來量產高純度的重組蛋白激酶。我們在研發人類ALPK1表現載體過程中，成功將ALPK1轉譯區域片段透過轉染於真核細胞中並大量表現，此技術解決先前載體僅應用在原核細胞表現或只能以小量轉染於真核細胞的瓶頸。針對尚未被鑑定或較難表達的激酶蛋白透過改良的載體增加蛋白轉譯區域之表現及純化效率，進行可提升蛋白質體學的生技應用與學術研究品質。此載體設計亦克服市售ALPK1重組蛋白僅有約80％純度與蛋白質濃度不足，無法進行蛋白質結晶技術分析的限制。本發明已可自行純化出大於90％的ALPK1重組蛋白激酶。 The function of ALPK1 gene is rarely known, and commercially available ALPK1 recombinant protein has disadvantages such as poor expression, only 80% purity, less protein concentration for crystallization, incapability of expression in prokaryotic cells, and mini transfection for eukaryotic cells. To overcome the shortcomings of conventional vectors, the objective of the present invention is to provide an expression factor expressing ALPK1 in eukaryotic cells for 90% purification to solve disadvantages of low purity, incapability of expression in prokaryotic cells, and mini transfection into eukaryotic cells.

備註

連絡單位 (專責單位/部門名稱)

產學合作處生物科技發展育成中心

連絡電話

(04)2205-3366轉1581

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