血紅蛋白轉譯後修飾之偵測方法及其應用ANALYTICAL METHOD OF POST-TRANSLATIONAL MODIFICATIONS IN HEMOGLOBIN

專利類型

發明

專利國別 (專利申請國家)

美國

專利申請案號

13/929,548

專利證號

US 8,906,605 B2

專利獲證名稱

血紅蛋白轉譯後修飾之偵測方法及其應用ANALYTICAL METHOD OF POST-TRANSLATIONAL MODIFICATIONS IN HEMOGLOBIN

專利所屬機關 (申請機關)

國立中正大學

獲證日期

2014/12/09

技術說明

目前研究3-硝基酪胺酸蛋白質的定量方法，早期以西方轉漬法為主，然而此方法的定量準確度不高且不具備結構上的資訊。近來由於質譜儀的發展，利用質譜方法不但可以針對硝化蛋白質中鑑定3-硝基酪胺酸的修飾，也可以更進一步確認胺基酸序列上修飾的位置。但是質譜方法的研究技術尚未運用在血紅蛋白的轉譯後修飾的定量上。在本實驗中，我們領先利用質譜方法針對血紅蛋白上的硝化、亞硝化與氧化等轉譯後修飾進行同時定量分析，此方法除了可以鑑定出修飾的胜肽外，更可以進一步確定修飾的胺基酸位置。搭配了最佳化的樣品處理方式以及極高靈敏度與準確度的奈升流速液相層析奈電噴灑游離串聯式質譜法，使得整個實驗只需要一滴血 (10 μL)的樣品即可同時定量血紅蛋白上的硝化、亞硝化與氧化等轉譯後修飾。此外，根據抽菸與非抽菸者之硝化修飾的定量結果，以統計運算後發現具有明顯的差異性，表示此分析技術所測得之硝化修飾的含量可以當作評估與抽菸相關疾病之生物指標。 A detection method of post-translational modifications in a hemoglobin is disclosed. The detection method comprises steps of providing a blood comprising the hemoglobin with post-translational modifications of nitration, nitrosylation, or oxidation; performing an extraction process to the blood by an organic solvent; quantifying the hemoglobin by a fluorescent spectrometry; hydrolyzing the hemoglobin into a plurality of peptides by an enzyme; and using a nanoflow liquid chromatography-nanospray ionization tandem mass spectrometry to detect and quantify the post-translational modifications in the hemoglobin.

備註

連絡單位 (專責單位/部門名稱)

技術移轉授權中心

連絡電話

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