運送去氧核醣核酸之融合蛋白及運送方法

專利類型

發明

專利國別 (專利申請國家)

中華民國

專利申請案號

095102842

專利證號

I 370176

專利獲證名稱

運送去氧核醣核酸之融合蛋白及運送方法

專利所屬機關 (申請機關)

國立成功大學

獲證日期

2012/08/11

技術說明

我們開發兩個融合蛋白PTD-TOPN，其PTD為一段含高量色氨酸的胜肽，具有穿越細胞膜且不需專一性受器的功能分別為能與傳統的胜肽核酸結合的Pep-1 (KETWWETWWTEW ) ，及能與傳統和不帶電荷的胜肽核酸有較佳結合力的Pep-2(KETWFETWFTEW) ，稱為protein transduction domain，而另一部分，可與DNA結合；為第一型人類拓樸酶(hTOPN I)之氨基端兩百個胺基酸，無DNA序列、DNA構形等限制且並具有nuclear localization signals ( NLS )可將DNA送至細胞核內。我們已經測試過其傳送DNA的可能性，利用含有綠螢光蛋白基因的質體（peGFP-N1）和Pep-1-TP作簡單混和後，再加入含有COS-7細胞株培養皿中；我們發現，綠螢光蛋白基因可以在細胞中表現。 總之，此融合蛋白可被使用於任一片段DNA及細胞，因此可做為一通透性DNA傳送系統。 We developed a needle-free DNA delivery system by constructing a fusion protein ( PTD-TOPN ) which consists of a membrane penetration domain that is a Tryptophan-rich peptide. It includes Pep-1 (KETWWETWWTEW) that efficiently delivery classical PNAs(peptide nucleic acids) and Pep-2 (KETWFETWFTEW) that enables efficient delivery of both classical and charged PNAs, as well as a DNA binding domain that is the N-terminal 200 amino acid residues of the human topoisomerase I. We have also demonstrated its feasibility in delivering DNA into nuclei by simply mixing a plasmid that has a GFP gene with the PTD-TOPN and then to COS-7 cells. We found that the GFP gene was expressed in COS-7 cells. In summary, this fusion protein can be used for any DNA fragment and cells; therefore, it can be a universal method to deliver DNA.

備註

本部(收文號1060027134)同意該校106年4月25日成大研總字第1064500318號函申請終止維護專利

連絡單位 (專責單位/部門名稱)

企業關係與技轉中心

連絡電話

06-2360524

網址