可稳定自发光的细菌质粒及其制备方法

專利類型

發明

專利國別 (專利申請國家)

大陸

專利申請案號

201010188051.3

專利證號

CN102268447B

專利獲證名稱

可稳定自发光的细菌质粒及其制备方法

專利所屬機關 (申請機關)

長庚醫療財團法人

獲證日期

2013/06/12

技術說明

一種革蘭陰性細菌專用之穩定自發發光載體， 其係包含luxABCDE自發發光基因、可啟動luxABCDE自發發光基因之啟動子、ColE1複製子、對氨比西林與卡那黴素之抗性基因、穩定質體之相關基因以及接合生殖作用相關的基因，使本發明可容易地以接合傳遞進入細菌中表現發光基因蛋白質， 又可穩定且大量地存在細菌中， 不需額外填加發光受質以及篩選抗生素仍可持續且高效能地發光， 方便於活體動物中直接觀察細菌的動態變化； 本發明製備步驟如下a . 獲得一可啟動發光基因之質體； b . 將含ColE1複製子及抗性基因之質體接入質體pSE34 中； c . 結合步驟a . 與b .質體製得本發明之質體。 This invention provides a method of creating a biotechnological product, an efficient and stable bio-luminescence vector which could be used for tracking Gram-negative bacteria when distributing inside animal body. Through conjugation, this auto-luminescence vector can be transmitted from bacteria to bacteria among Gram-negative bacteria, and may facilitate bacteria to be luminescence-labeled for analyzing the dynamic change of bacteria within animal body in vivo. This system includes a luxABCDE, a high copy number of ColE1 replicon, and a high plasmid stability of the conjugative and broad host-ranged plasmid pSE34 from Salmonella enterica serovar Enteritidis Sal550. This pSE-Lux1 can conjugatively transmit among bacteria with broad host range, but also stably maintain in bacteria to express the luxABCDE without supplementing the subtract for luciferases and the antibiotics for plasmid selection, beneficial to directly observe the dynamic change of bacteria inside animal in vivo.

備註

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