含內部核醣體進入位置序列之表達載體及其多基因表現系統

專利類型

發明

專利國別 (專利申請國家)

中華民國

專利申請案號

103104691

專利證號

I 496887

專利獲證名稱

含內部核醣體進入位置序列之表達載體及其多基因表現系統

專利所屬機關 (申請機關)

國立臺灣大學

獲證日期

2015/08/21

技術說明

在雙基因mRNAs(bicistronic mRNAs)中，除非在兩個基因間具有內部核糖體插入位點 (Internal ribosomal entry site; IRES)，否則位於下游的第二個基因通常不會轉譯成蛋白質。由 於IRES 具有上述非凡特性，因此當吾人想有效率、且在調控下共表達 (co-expression) 多基 因時，最常被利用就是含IRES 的多基因表達系统。此類型之載體有許多重要的應用範圍， 例如可用於基因療法 (gene therapy)；亦可設計成能同時共同表現功能上具相關性的蛋白質， 以用來遞送多個具關聯性的防禦基因；也可用於表現單一基因及標誌分子。而在使用含IRES 的表現載體時，其中一項限制為大部分IRES 具有物種特異性 (species specific)，所以無法 跨物種利用之。此外在真核生物中，一般較少有自然存在的雙基因 mRNA 序列，因此含IRES 的載體大多使用來自可感染標的物種的病毒IRES。 本實驗室已在蝦白點症病毒鑑定出一個IRES 序列(Virology 2009)，且白點症病毒大型 基因體中有許多同向轉錄基因群，目前已鑑定出多個多基因序列 (polycistronic sequence)， 這些序列皆可能帶有極具開發潛力的IRES 候選序列。針對蝦而言，目前尚無適用之多基因 表達載體，因此提出預計為期兩年之計畫，最終目標是建立一個商品化且適用於蝦的IRES 技術平台。第一年擬鑑定出不同IRES 序列及活性，以找到最適開發成多基因表達載體技術 平台之IRES 序列。由於目前尚無可適用之蝦細胞株，因此第一年之試驗僅以昆蟲細胞Sf9 進行研究，故第二年擬將此含有IRES 之多基因表達載體平台加以應用至蝦造血幹細胞(與 瑞典學者Söderhäll K 合作)，及蝦活體(與中研院臨海研究站陳志毅老師合作)之研究上，如 將其應用在抗病基因轉殖蝦蝦之研究。蝦之多基因表達載體系統對基礎及應用研究都是相 當重要的工具與平臺，希望透過本計畫之成果將其商品化，有助於學術之研究及應用。此 外，此項具有新穎性之多基因表達載體技術平台可望申請專利及技術授權。 In bicistronic mRNAs, the second cistron will generally not be translated unless a special sequence is present. This sequence is the internal ribosome entry site (IRES), and it is located between the two cistrons. Because of this unique characteristic, when multiple genes need to be co-expresses in an efficient and regulated manner, an IRES-based multiple gene expression vector is often used. These vectors have several important applications. For example, they can be used for gene therapy; they can be designed to coordinate the expression of functionally related proteins, in order to simultaneously deliver multiple defense genes; or they can be used to expressed a single gene with marker. One limitation on the use of purpose-built IRES expression vectors is that most IRES are species-specific. In the higher eucaryotes, naturally bicistronic mRNAs are quite rare. Consequently many IRES constructs are designed using the IRES from viruses to which the target species is susceptible.

備註

本部(第1080018808號)同意該校108年03月20日校研發字第1080019626號函申請終止維護案。

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