發明
中華民國
104131874
I 582107
用以純化之具有矽氧顆粒的板、其製造方法及樣品純化方法
中國醫藥大學
2017/05/11
樣品中若能藉由去除干擾物(如鹽、界面活性劑或特定族群分析物等)則有助於提升分析物的質譜偵測靈敏度。因此我們製備出疏水性與親水性樣品盤以快速純化分析物。在疏水性樣品盤上可直接去除樣品鹽類與介面活性劑。在親水性樣品盤,可以移除掉非醣胜肽以提升醣胜肽的靈敏度。此種平盤操作方式可減少操作步驟、降低樣品損失量而改善分析靈敏度。若以疏水性樣品盤為例,此疏水性平盤也可在五分鐘內快速去除樣品中的高鹽類KCl並成功分析高密度脂蛋白質,其去鹽能力與經過24小時透析後之高密度脂蛋白質的分析結果相同。若以親水性樣品盤為例,將胜肽與醣胜肽混合樣品溶液滴在層析顆粒上反應約2-5分鐘後,以95%% ACN溶液清洗以去除胜肽,再利用10%ACN將醣胜肽沖提出來,完成醣胜肽之純化分析。 We developed a simple method for fabricating functionalized plates for on-plate subsequently MALDI-TOF analysis sample desalting or enrichment for. By coating functionalized-coated silica particles on a PDMS plate, these particles can form a firmly monolayer of particles on PDMS membrane. We fabricated hydrophobic plate by coating octadecyl-coated silica porous particles on PDMS-coated MALDI-TOF target to remove SDS, urea and KCl for peptide/protein purification and found to have improved sample recovery compared to commercial tips. The capacity of the ∼2.8 mm diameter C18 spot was estimated to be ∼10 µg of BSA digests. For high density lipoproteins samples, the hydrophobic plates provide a rapid approach with reduced sample volume for desalting of KBr compared to dialysis method. Hydrophilic plate was also fabricated and performed with glycopeptide enrichments.
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