發明
中華民國
095112725
I313302
新穎連續性偵測第四型胜肽精胺酸亞氨酶活性之光譜分析A Continous Spectrophotometric Assay Method For Peptidylarginine Deiminase TYPE 4 Activity
中山醫學大學
2009/08/11
本發明是描述一個簡單與連續性測定胜肽精胺酸脫亞氨酶活性之光譜分析法。胜肽精胺酸脫亞氨酶使得胜肽精胺酸進行脫亞氨作用,而產生胜肽瓜胺酸與氨。胜肽精胺酸水解釋放出的氨,連結至麩胺酸脫氫酶催化反應中,使α-酮基戊二酸進行還原性胺化作用,形成麩氨酸,並且造成菸鹼醯胺腺嘌呤雙核苷酸還原態(NADH)氧化。當菸鹼醯胺腺嘌呤雙核苷酸還原態氧化會減少340 nm波長吸光,並且能夠被連續偵測。高純度人類胜肽精胺酸脫亞氨酶利用本發明方法測定其活性之特異性較普遍使用的呈色方法佳。本連續性光譜分析法具有高度地敏感性和精確性,適用於胜肽精胺酸脫亞氨酶之酵素動力學分析。此外,本發明所測得胜肽精胺酸脫亞氨酶的一半活性所需鈣離子濃度,也較以前所使用呈色分析法好。
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