診斷及治療α-異烯醇酶(α-enolase)相關疾病之抗-α-異烯醇酶抗體

專利類型

發明

專利國別 (專利申請國家)

中華民國

專利申請案號

099102465

專利證號

I 468176

專利獲證名稱

診斷及治療α-異烯醇酶(α-enolase)相關疾病之抗-α-異烯醇酶抗體

專利所屬機關 (申請機關)

臺北醫學大學

獲證日期

2015/01/11

技術說明

先前研究報告指出enolase I 蛋白濃度上升可以在約65%的非小細胞肺癌(NSCLC)的病人身上偵測到，而且，高效價的anti-enolase I 抗體只有在一小部份的病人(約7.4%)身上發現，這些實驗發現在臨床上的重要性目前並不清楚。我們深入研究從免疫雞隻所產生的多株以及單鏈變異區片段(single-chain variable fragment; scFv)的anti-enolase I抗體，由大腸桿菌製造出來的重組enolase I 蛋白在高度純化後，用來注射到雞隻產生高效價的特異性多株anti-enolase I IgY 抗體。這些表現的重鏈與輕鏈變異區基因(VH and VL) 從脾臟B細胞中分離出來，而且被放大來建構帶有scFv抗體的嗜菌體展示基因庫，經過四個回合的篩選過程後，隨意選擇的細胞株的scFv抗體分子被表現出來，而且他們對enolase I蛋白的結合的特異性也經由競爭型的ELISA、流氏細胞儀與免疫螢光染色等方法確認。根據這些實驗結果，我們相信這些多株以及scFv IgY抗體在未來發展針對肺癌或其他惡性腫瘤疾病的分子檢驗與治療藥物應該會有很大的幫助。 In the present study, we characterized polyclonal and single-chain variable fragment (scFv) anti-enolase I antibodies from immunized chickens. The E. coli-derived recombinant enolase I protein was purified to its high homogenicity and used to generate high titer of specific anti-enolase I IgY antibodies in chickens. The expressed heavy and light chain variable genes (VH and VL) were isolated from spleen B cells and amplified to construct phage display libraries with scFv antibodies. After four rounds of panning selection, the scFv antibodies of randomly chosen clones were expressed and their binding specificity to enolase I protein was verified using competitive ELISA, Flow cytometry and immunofluoresence staining. Based on these results, it is believed that these polyclonal and scFv IgY antibodies may be helpful in the development of molecular diagnostic and therapeutic agents for lung cancers or other malignant diseases in the future.

備註

本部(收文號1100046318)同意該校110年7月16日北醫校事字第1100002292號函申請終止維護專利(北醫)

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