發明
美國
14/057,999
US 9,329,180 B2
可定量任何聚乙二醇分子與其修飾物之抗聚乙二醇表現細胞Preparation Of Anti-Peg Antibody Expressing Cell And Application Thereof
高雄醫學大學
2016/05/03
聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)除了具有化學預防大腸癌、加速受損脊椎修復等功能;修飾聚乙二醇至藥物、蛋白質或奈米藥物亦被證實可改進藥物的生物活性、安全性及療效;已獲得美國食品藥物管理局同意可於人體使用;因此定性與定量聚乙二醇及其修飾分子對於藥物的發展與臨床應用將會很重要。我們將先前已開發的抗聚乙二醇抗體及抗甲氧基聚乙二醇抗體表現在細胞膜上,可搭配Biotin修飾之抗聚乙二醇抗體(AGP4-Biotin),建立一套以細胞為基礎的三明治酵素免疫分析法;或是搭配Biotin修飾之聚乙二醇(PEG-Biotin),建立一套競爭性酵素免疫分析法。此兩種分析法即使在含有40 %胎牛血清的狀況下,亦可相當敏感的定量聚乙二醇自由分子及各種聚乙二醇修飾之巨分子(蛋白質、奈米藥物及脂質體),且敏感度均可達奈克(ng)的水準。因此,以抗聚乙二醇(抗甲氧基聚乙二醇)之細胞為平台,所建立的三明治酵素免疫分析法及競爭性酵素免疫分析法,將可廣泛應用於臨床前及臨床上各種聚乙二醇及其修飾分子之定量。 In this invention, we expressed anti-PEG antibodies or anti-methoxyl-PEG (anti-CH3O-PEG) antibodies on cell surface which can collocate with a biotinylated anti-PEG antibody (AGP4-Biotin) or biotinylated PEG (PEG-Biotin) to develop a cell-based sandwich ELISA or a cell-based competition ELISA, respectively. Both of these two methods could sensitively quantify free PEG and PEG-modified macromolecules (proteins, nanoparticles and liposomes) as sensitive as nano-gram level.
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