發明
美國
13/664,020
US 8,741,562 B2
乙基化胸腺嘧啶DNA加成產物之偵測方法METHOD OF DETECTING ETHYLATED THYMIDINE DNA ADDUCTS
國立中正大學
2014/06/03
在目前研究乙基化胸腺嘧啶的加成產物,主要仍仰賴磷32放射性同位素後標誌法(32P-postlabeling)來進行分析。然而對於缺乏適當的內標準品等缺點,讓磷32放射性同位素後標誌法的技術無法達到完美的準確性。在本實驗中,我們領先利用質譜方法針對乙基化胸腺嘧啶O2-edT、N3-edT、O4-edT加成產物進行分析,搭配了最佳化的樣品處理方式以及極高靈敏度與準確度的穩定同位素稀釋奈升流速液相層奈電噴灑離子化串聯式質譜法,每次實驗中只需要從大約2毫升的血液中萃取50微克的DNA,即可同時定量分析三個乙基化胸腺嘧啶加成產物。 1. We have developed a highly sensitive, accurate, and quantitative assay for simultaneous detection and quantification of O2-edT, N3-edT (N3-ethylthymidine), and O4-edT adducts in leukocyte DNA by stable isotope dilution nanoflow liquid chromatography−nanospray ionization tandem mass spectrometry (nanoLC−NSI/MS/MS), thus the amount of sample used is reduced. 2. Only 50 μg of DNA, isolated from approximately 2 mL of human blood, is needed for each analysis.
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