利用假性狂犬病毒生產豬環狀病毒二型類病毒顆粒

專利類型

發明

專利國別 (專利申請國家)

中華民國

專利申請案號

102101538

專利證號

I 607083

專利獲證名稱

利用假性狂犬病毒生產豬環狀病毒二型類病毒顆粒

專利所屬機關 (申請機關)

國立中興大學

獲證日期

2017/12/01

技術說明

假性狂犬病毒(pseudorabies virus, PRV)及豬環狀病毒二型 (porcine circovirus type 2, PCV2)皆為引起養豬產業嚴重經濟損失的重要致病原。疫苗免疫策略已顯示能有效預防PRV的感染，且醣蛋白E (glycoprotein E, gE)基因缺損的PRV標記疫苗(marker vaccine)已廣泛於世界各地使用。本發明即為構築gE基因缺損並包含PCV2外殼蛋白(capsid protein, Cap)之cap基因的PRV重組病毒株，並進一步表現出豬環狀病毒二型之類病毒顆粒。經由同源重組(homologous recombination)方法，已成功構築出兩株重組病毒株包括gE-/PCV2 cap+ PRV及gE及tk雙基因缺損之gE-tk-/PCV2 cap+ PRV。此兩株重組病毒株皆已在特定位置嵌入PCV2之cap基因，在病毒複製時能表現PCV2 Cap蛋白並且這些Cap表現蛋白可以自行組裝為類病毒顆粒(virus-like particles, VLPs)。而雙基因缺損重組病毒株gE-tk-/PCV2 cap+ PRV，經老鼠致死劑量LD50測定之結果顯示已完全減弱毒力，具有發展為活減毒疫苗之潛力。進一步以純化的VLPs進行小鼠免疫試驗，結果顯示免疫組小鼠可產生針對PCV2 Cap蛋白之抗體反應。未來將可進一步開發出安全有效且成本低廉之雙價疫苗，以提供對於假性狂犬病毒及豬環狀病毒二型之防治。 Both pseudorabies virus (PRV) and porcine circovirus type 2 (PCV2) can cause economically important swine diseases. The purpose of this project is to construct gE gene-deleted (gE-) PRV recombinant viruses expressing the PCV2 capsid protein (Cap) for further developing as bivalent vaccines. Two recombinant PRV viruses, gE-/PCV2 cap+ PRV and gE-tk-/PCV2 cap+ PRV, have been successfully constructed using the homologous recombination technique. Both recombinant viruses contain the PCV2 cap gene and demonstrate expression of Cap protein during virus replication that could assembly to form virus-like particles (VLPs). In addition, the gE and tk double gene deleted virus (gE-tk-/PCV2 cap+ PRV) was completely attenuated in mice, suggesting its potential as an attenuated live vaccine. Furthermore, immunization of mice with purified PCV2 VLPs could induce antibody response to PCV2 Cap.

備註

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