二級抗體所辨識之抗原決定位及其用途

專利類型

發明

專利國別 (專利申請國家)

中華民國

專利申請案號

103115717

專利證號

I 593967

專利獲證名稱

二級抗體所辨識之抗原決定位及其用途

專利所屬機關 (申請機關)

高雄醫學大學

獲證日期

2017/08/01

技術說明

蛋白標記(Protein marker)若能在西方點墨法(Western blot)中直接被目前市面上最廣泛使用的任何抗老鼠/兔子之二級抗體辨識且自動呈色於底片上，將能使實驗人員更有效率、方便且準確的進行實驗。我們在本研究中開發了一種含有老鼠及兔子抗體線性抗原決定位標籤，此標籤能被抗老鼠/兔子之二級抗體辨識且自動呈色於底片上。我們利用結構模擬軟體篩選三段老鼠(M1, M2, M3)及三段兔子(R1, R2, R3)IgG抗體Fc區域的線性抗原決定位(Linear epitope; LE)作為標籤的候選序列(IgG Fc LE)。利用西方點墨法發現老鼠(M2)及兔子(R2)抗體線性抗原決定位能成功被BL21大腸桿菌表現且可被抗老鼠/兔子之二級抗體直接辨識、自動呈色於底片上。我們將M2及R2結合成大小約15 kDa的含有老鼠及兔子抗體線性抗原決定位標籤(M&R tag)，並在其後依序接上不同分子量大小之蛋白，組成含老鼠及兔子抗體線性抗原決定位標籤之重組蛋白標記(M&R linear epitopes protein marker; M&R LE protein marker; 15-120 kDa)。利用西方點墨法發現M&R LE protein marker能成功被BL21大腸桿菌表現且可被抗老鼠/兔子之二級抗體直接辨識、自動呈現出規則的分子量大小於底片上。我們研發的含有老鼠及兔子抗體線性抗原決定位標籤具有以下優點:(1)方便性 (2)準確性 (3)可加熱 (4)廣泛應用性 (5)可作為陽性控制組。此標籤除可當作蛋白質標記(Protein marker)或重組蛋白質(Recombinant protein)的偵測標籤(tag)外，更可當做實驗的陽性控制組(Positive control)，使實驗人員能更方便且精準的判斷實驗結果，未來將有相當大的機會能取代目前傳統之蛋白質標籤，對合作企業其蛋白質分子量標記市場將開創無限的商機。 MW markers that can be self-revealed by any anti-mouse/rabbit secondary Abs will offer great efficacy and convenience for Western blot. Here, we develop a self-revealing MW marker-MR marker, which contains the linear epitopes from Fc region of mouse and rabbit IgG (IgG Fc LE). It can be recognized and self-revealed by any anti-mouse/rabbit secondary Abs on film. We fused M2 and R2 sequences to form a 15-kDa fusion protein (M&R tag), and then assembled with different recombinant proteins to generate 15 to 120 kDa self-revealing molecular weight markers (M&R LE protein marker). The M&R LE protein marker could be self-revealed by anti-mouse and rabbit IgG secondary Abs on film. The LE M&R tag possesses the following advantage: (1) Convenience (2) Accuracy (3) Heat-resistance (4) Wide applicable field (5) As a positive control. They maintain great promise for commercialization and excellent marketing outlook, thus offering great competition edge to the participating firms in the future.

備註

連絡單位 (專責單位/部門名稱)

智財保護與科技管理組

連絡電話

07-3138030

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