發明
美國
12/659,422
US 9,086,409 B2
免疫分析晶片Immunoassay Biochip
國立成功大學
2015/07/21
近年來,由於許多重大傳染病如急性嚴重呼吸道症候群(severe acute respiratory syndrome,SARS)在全世界所造成的傷害,讓國人記憶深刻,使得疾病的「即時性檢測」受到各界的重視。而傳統的生化檢驗須透過繁複的操作步驟才能獲得結果,在血清學研究方面的酵素連結免疫吸附法(enzyme-linked immunosobent assay,ELISA)之技術建立後,使疾病或病原的診斷有突破性的發展,診斷的歷程可在數天內確認結果。血清學分析上用酵素連結免疫吸附法(ELISA)檢測感染時期微生物所誘導的抗體反應,主要是測免疫球蛋白G (Immunoglobulin G, IgG)和免疫球蛋白M ( Immunoglobulin M, IgM)兩種免疫球蛋白,IgM在感染前期會大量表現,而IgG的出現是曾經感染。ELISA之優點為高靈敏度、高專一性,可同時進行大量樣本檢測,但是其缺點是無法同時偵測IgG和IgM,而且耗費許多處理時間,其繁複的操作步驟更容易因人為操作,產生結果上的誤差。藉由本發明提出一個可同時測出IgG和IgM的快速自動化微型的微流體檢測晶片,將微型磁珠應用檢體之萃取,並在本晶片上自動地完成抗原抗體的接合反應以及檢體的螢光偵測,以減少人為操作的不定性,更可大幅縮短操作時間與步驟,其具有高檢測靈敏度、可拋棄式、可攜帶性、低樣品及檢體消耗量、低耗能、體積小以及成本低等優點,相較傳統分析檢測技術下,有著突破性的發展價值。藉由晶片系統的元件一薄膜式檢體混合模組、二雙向式微流體傳輸模組、一微陣列式環型磁線圈以及三個單向微流體傳輸模組和兩個螢光偵測區。利用抗登革熱抗體與表面修飾環氧化物(epoxy)的磁珠尺寸為4.5 m,先將革熱病毒與磁珠上之抗體結合,再加入臨床檢體以及含螢光訊號的二段偵測抗體,並藉由晶片所產生之微型磁場對其進行純化。最後經由後段晶片上的螢光偵測區,快速檢測檢體內的免疫球蛋白IgG和IgM。 The current invention proposed an integrated microfluidic system for rapid serological analysis of antibodies associated with the detection of dengue fever by utilizing antigen-holding magnetic beads. Serological detection of antibodies based on conjugating IgM and IgG based on ELISA has become a common standard method for the detection and differentiation of dengue virus infections. The invented system provided a new method for rapid detection of IgG and IgM simultaneously. The antigen-holding magnetic beads were incubated with the clinical serum samples, followed by purifying these beads utilizing a magnetic field generated from the on-chip microcoils array. The fluorescence-labelled antibodies would be further bound onto the surface of the IgG/IgM that attached on the magnetic complex. The optical signals can be detected immediately and analyzed by an optical detection module. The integrated system may provide a powerful platform for rapid diagnosis of infectious diseases.
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