發明
中華民國
100120777
I 408233
FOXO6多株抗體及其製備方法FOXO6 POLYCLONAL ANTIBODY AND METHOD FOR PREPARING THE SAME
國立中央大學
2013/09/11
Forkhead 轉錄因子由於都具有一段稱為 Forkhead box 的 DNA 結合位,所以被分類為同一族群,而且此族群的 DNA 結合位具高度保留性,其中的亞族 FoxO,包含了 FoxO1、FoxO3、FoxO4、FoxO6 都和許多生理過程有關,像是細胞週期的調控、DNA 的修復、細胞的分化以及凋亡。在這些 FoxO 中,近期才被發現的 FoxO6 在許多生理反應過程中所扮演的角色以及其表現情形都尚未被研究,也因為目前市售的 FoxO6 抗體專一性太差,因此造成許多研究上的不便。為了想獲得專一性較好的 FoxO6 抗體,故我們利用大腸桿菌 (E. coli) 將 FoxO6 的第229~492個胺基酸大量表現出來,藉由注射到兔子的皮下引起免疫反應,接著取得兔子的血清,在經過一系列的測試後確定此多株抗體 (polyclonal antibody)的效價及專一性,並且在西方墨點法 (western blot)的測試中可得知此抗體除了可以偵測到老鼠的 FoxO6之外還可辨認到人類的 FoxO6;此抗體在生物技術方面的應用相當廣泛除了西方墨點法外,也可以應用在各種免疫偵測及治療中。在免疫螢光染色上,本抗體對於細胞株或是組織切片中的 FoxO6 蛋白質表現也都能有效的偵測。¬此抗體為目前世界上唯一具有 FoxO6 專一性的抗體,因此許多從事神經科學、腫瘤生物學、以及發育生物學的科學家們都可以利用此多株抗體進行許多免疫分析的研究。 The expression and function of the recently discovered FoxO6 in most physiological processes has not been studied before. Unfortunately, this study has been hindered by the lacking of commercially available antibody for detecting FoxO6, so we used FoxO6-speific domain (amino acid 229~492) as antigen to produce FoxO6 polyclonal antibody in rabbits. After titering, we are sure that this antibody can recognize FoxO6 specifically without cross-reacting with other FoxOs. This antibody can be used in Western blotting at is 1:105 dilution and specifically recognize FoxO6 protein. Besides, this antibody can also be used in immunofluorescence to detect the localization of FoxO6 in cell lines or tissue sections. To date, this antibody is the only FoxO6-specific antibody in the world and its application to various immunoassys will be highly appreciated by scientists working in Neurosciences, Cancer biology, and Developmental biology.
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